Screen Quest Fluo-8 NW鈣測定試劑盒提供均勻的熒光測定，用于檢測細胞內鈣動(dòng)員。表達通過(guò)鈣發(fā)出信號的感興趣的GPCR的細胞預加載有可以穿過(guò)細胞膜的Fluo-8 NW。一旦進(jìn)入細胞內，Fluo-8 NW的親脂性阻斷基團被酯酶裂解，導致帶電荷的熒光染料留在細胞內。與鈣結合后，其熒光大大增強。當用激動(dòng)劑刺激細胞時(shí)，該受體發(fā)出細胞內鈣的釋放信號，這顯著(zhù)增加了Fluo-8 NW的熒光。 Fluo-8 NW具有長(cháng)波長(cháng)，高靈敏度和> 100倍熒光增強的特性，是測量細胞鈣的理想指標。 Screen Quest Fluo-8 NW鈣測定試劑盒為監測G蛋白偶聯(lián)受體和鈣通道提供了一種優(yōu)化的檢測方法。該測定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式進(jìn)行，并且易于適應自動(dòng)化。

樣品分析方案

概述

用含有0.5-1％FBS的Fluo-8 NW染料加載溶液

在生長(cháng)培養基中制備細胞（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）

在室溫下孵育1小時(shí)

監測Ex / Em = 490 / 525nm處的熒光強度